Potent homogeneïtzador ultrasònic per Powsonic: interrupció de les cèl·lules d’alta freqüència i solució de lisi

Paràmetre

Introducció:

Interrupció cel·lular i lisi per ultrasons
Els homogenitzadors ultrasònics s’utilitzen principalment per a la preparació i producció de mostres. Aquestes àrees inclouen, en particular, l’homogeneïtzació, l’emulsificació i la suspensió de diverses substàncies, així com l’acceleració de les reaccions químiques, la interrupció cel·lular i l’extracció de contingut cel·lular. Utilitzant homogenitzadors ultrasònics certes substàncies es poden destruir selectivament, es poden escurçar processos de preparació tediosos i el rendiment de moltes reaccions va augmentar. La comparació amb dispositius de processament mecànics com ara molins de boles planetàries, rotor / stator o homogeneïtzadors de bretxa demostra que els homogeneïtzadors ultrasònics treballen amb una major eficiència i, en particular, fan possibles resultats reproduïbles. La tendència en analítica és cap a volums de mostres més petits i menors i la reducció de l’ús de productes químics. Per exemple, l’ús d’homogenitzadors d’ultrasons ha esdevingut d’importància central en els darrers anys, on fins i tot les quantitats de mostra més petites s’han de processar ràpidament, costar -se de manera eficaç i reproductiva.

Interrupció de les cèl·lules i microorganismes

Als laboratoris moderns, s’utilitzen homogeneïtzants ultrasònics per trencar les parets cel·lulars per extreure el contingut de les cèl·lules, e. g. les proteïnes sense danyar -les. Una part de l’energia introduïda a la suspensió cel·lular es transforma en calor per fricció. Per tal d’evitar danys tèrmics al contingut de la cèl·lula, la mostra és cíclicament intermitent sonicada o refredada en un recipient de refrigeració durant la sonicació. Una cèl·lula Rosett permet una sonicació uniforme de microorganismes, ja que l’energia d’ultrasons obliga la mostra a circular repetidament sota la sonda i a través dels braços laterals. Situat al bany de gel, el contingut es pot refredar eficaçment a causa de la superfície de vidre ampliada.

La interrupció de les membranes cel·lulars depèn fortament de l’elasticitat de les cèl·lules. Els components cel·lulars, com els mitocondris o el citoplasma, es poden alterar fraccionadament en variar l’energia d’ultrasons d’entrada i, per tant, la potència d’extracció. En el cas de bacteris especialment resistents (per exemple, estreptococs), fongs, espores, llevats o mostres de teixit, és possible una destrucció directa amb amplituds ultrasòniques molt elevades mitjançant micro puntes, ja que les micro puntes poden aconseguir una entrada d’energia molt gran en quantitats de mostra més petites.

Quan es treballa amb quantitats de microlitre, els escumes i les esquitxades del vaixell són un problema més gran. És possible una valuosa pèrdua de material de mostra. Per tant, la regulació de la potència és molt important. Si les cèl·lules amb parets làbils s’han de interrompre, només és necessària poca potència o petita amplitud.

Per tal de dissoldre grans quantitats contínuament, s’utilitzen vasos especials de flux de vidre o acer inoxidable amb una cambra de sonicació per tractar cada partícula d’una suspensió amb la mateixa intensitat. Els danys tèrmics al contingut de la cèl·lula es poden excloure si el vaixell també està equipat amb una jaqueta de refrigeració. Per tal d’evitar la contaminació per partícules estrangeres, per exemple, les partícules d’erosió de la sonda - s’ha de preferir una sonicació indirecta en un reforç de tassa o una banya de tassa. Aquest mètode aconsegueix una intensitat i un refredament uniformes.